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人纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

更新時間:2018-04-18      瀏覽次數(shù):1936

人纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎大家!

纖維蛋白原,是一種由肝臟合成的具有凝血功能的蛋白質(zhì)。纖維蛋白是在凝血過程中,凝血酶切除血纖蛋白原中的血纖肽A和B而生成的單體蛋白質(zhì)。

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作用
纖維蛋白原可以促進血小板的聚集,促進平滑肌和內(nèi)皮細(xì)胞的生長、增殖和收縮,增加血液粘滯性和外周阻力,引起內(nèi)皮細(xì)胞損傷,促進膠原和去氧核糖核酸合成,趨化單核/巨噬細(xì)胞向內(nèi)膜下遷移,促進紅細(xì)胞粘著和血栓形成,因此,它在心血管疾病的發(fā)病中具有十分重要作用。
研究意義
研究資料表明:①纖維蛋白原水平升高患者中,多數(shù)可發(fā)生心肌梗塞或猝死,且纖維蛋白水平越高,危險性亦越大;②血漿纖維蛋白原升高是促進動脈粥樣硬化發(fā)病的一個重要因素;③纖維蛋白原升高,血液處于高凝狀態(tài),血流速度減慢,血液粘滯性增加,易于產(chǎn)生血栓;④高血壓時常伴有纖維蛋白原水平升高,它是誘發(fā)和加重高血壓的一個重要原因;⑤纖維蛋白原與脂肪代謝有著密切關(guān)系;⑥此外,老年、吸煙、肥胖、應(yīng)激、口服避藥和糖尿病等可以促進體內(nèi)纖維蛋白原水平升高。 

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檢測原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心法:抗人纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)會與單抗結(jié)合,游離的成份被洗去。加入酶標(biāo)抗體,抗人纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)抗體與結(jié)合在單抗上的人纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物,若反應(yīng)孔中有纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1),辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現(xiàn)藍(lán)色,加終止液變黃。在450nm處測OD值,纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)濃度與OD450值之間呈正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中的纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)濃度。

人纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)檢測試劑盒樣品收集:

1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。

2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。

3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會

影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。

5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測

6. 樣品應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。

7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測),或-80℃(6個月內(nèi)檢測),避免反復(fù)凍融。

8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,請根據(jù)實際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù))。

試驗所需自備物品:

1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)

2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL

3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水

4. 吸水紙

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